來(lái)看看專業(yè)的人員是如何使用細(xì)胞計(jì)數(shù)片做實(shí)驗(yàn)的
更新時(shí)間:2021-07-01瀏覽:1105次
細(xì)胞計(jì)數(shù)片是一塊特制的厚型載玻片,載玻片上有四個(gè)槽構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬,其中間又被一短橫槽分隔成兩半,每個(gè)半邊上面各刻有一小方格網(wǎng),每個(gè)方格網(wǎng)共分九個(gè)大格,中央的一大格作為計(jì)數(shù)用,稱為計(jì)數(shù)區(qū)。計(jì)數(shù)區(qū)的刻度有兩種:一種是計(jì)數(shù)區(qū)分為16個(gè)大方格(大方格用三線隔開),而每個(gè)大方格又分成25個(gè)小方格;另一種是一個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)分成25個(gè)大方格(大方格之間用雙線分開),而每個(gè)大方格又分成16個(gè)小方格。但是不管計(jì)數(shù)區(qū)是哪一種構(gòu)造,它們都有一個(gè)共同特點(diǎn),即計(jì)數(shù)區(qū)都由400個(gè)小方格組成。
細(xì)胞計(jì)數(shù)片實(shí)驗(yàn)原理:當(dāng)待測(cè)細(xì)胞懸液中細(xì)胞均勻分布時(shí),通過測(cè)定一定體積懸液中的細(xì)胞的數(shù)目,即可換算出每毫升細(xì)胞懸液中細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目。
細(xì)胞計(jì)數(shù)片的具體操作:
1. 將計(jì)數(shù)板及蓋片擦拭干凈,并將蓋片蓋在計(jì)數(shù)板。
2. 將細(xì)胞懸液吸出少許,滴加在蓋片邊緣,使懸液充滿蓋片和計(jì)數(shù)板之間,靜置3min,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。
3. 計(jì)算板四大格細(xì)胞總數(shù),壓線細(xì)胞只計(jì)左側(cè)和上方的。然后按公式計(jì)算:細(xì)胞數(shù)/mL=四大格細(xì)胞總數(shù)/4×104,說明:公式中除以4,因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為:1.0mm(長(zhǎng))×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3而1ml=1000mm3(注意:鏡下偶見有兩個(gè)以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),應(yīng)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)算,若細(xì)胞團(tuán)10%以上,說明分散不好,需重新制備細(xì)胞懸液)。